МЕТОДИКА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ТУБЕРКУЛЕЗНОГО
АЛЛЕРГЕНА – «ДИАСКИНТЕСТ®»
Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении пред-
ставляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифици-
рованной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT. Содержит два свя-
занных между собой антигена – CFP10 и ESAT6, присутствующих в вирулентных
штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis. Эти
антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.bovis, включая российский, из которого
готовятся вакцины туберкулезные – БЦЖ и БЦЖ-М. Одна доза (0,1 мл) препарата
содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 – 0,2 мкг, фенол (0,25мг) в качестве
консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфор-
нокислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорнокислый
однозамещенный, вода для инъекций – до 0,1 мл. 10
Биологические и иммунологические свойства
Аллерген туберкулезный рекомбинантный не обладает сенсибилизируюшим
действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной
инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа.
Специфическая активность препарата сопоставима с активностью туберкулина.
Однако зависимость ответной реакции от степени выраженности туберкулезного по-
ражения более значительна при пробах с аллергеном туберкулезным рекомбинант-
ным, чем с туберкулином.
Способ применения и дозировка препарата
Методическое руководство проведения внутрикожной пробы с препаратом
ДИАСКИНТЕСТ® осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится специально
обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных
тестов. Препарат вводят строго внутрикожно. Для проведения пробы применяют
только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед
употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Запре-
щается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.
Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом.
Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет ис-
пользован для инъекции (СП 3.3.2342-08 от 03.03.2008г.) Если туберкулиновые шпри-
цы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для под-
кожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препара-
та в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой, а на шприц надева-
ют прилагаемую к нему иглу и прокалывают отдельной иглой для внутримышечного
введения, которую оставляют в пробке флакона для следующих заборов препарата в
шприцы, накрыв стерильной салфеткой. Туберкулиновым шприцем набирают 0,2 мл
(две дозы) препарата и выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный там-
пон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в за-
щищенном от света месте.
Пробу проводят обследуемым в положении сидя. После обработки участка кожи на
внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние
слои натянутой кожи параллельно ее поверхности вводят 0,1 мл препарата. При поста-
новке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде «лимонной корочки» белова-
того цвета диаметром 5-10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкули-
ном, аллерген туберкулезный рекомбинантный вводят в другое предплечье.
Результат пробы оценивают врач или обученная медсестра через 72 ч с момента
ее проведения путем измерения поперечного (по отношению к оси предплечья) раз-
мера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гипе-
ремию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.11
Ответная реакция на пробу может быть:
отрицательной – при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при на-
личии «уколочной реакции»;
сомнительной – при наличии гиперемии без инфильтрата;
положительной – при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.
Условно различают:
слабо выраженную ответную кожную реакцию на препарат – при наличии инфиль-
трата размером до 5 мм;
умеренно выраженную – при размере инфильтрата 5-9 мм;
выраженную – при размере инфильтрата 10 мм и более;
гиперергическую – при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-
некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените, независимо от
размера инфильтрата.
Кожная гиперчувствительность замедленного типа к препарату, как правило,
отсутствует (отрицательная реакция на пробу):
у не инфицированных M. tuberculosis лиц;
у лиц, ранее инфицированных M. tuberculosis, с неактивной туберкулезной инфек-
цией;
у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изме-
нений, при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструменталь-
ных и лабораторных признаков активности процесса;
у лиц с клинически излеченным туберкулезом.
Наряду с этим, проба может быть отрицательной у больных туберкулезом с выра-
женными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течени-
ем туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования M. tuberculosis,
на ранних стадиях туберкулезного процесса, а также с сопутствующими заболева-
ниями, сопровождающимися иммунодефицитным состоянием. В связи с этим, при
наличии характерных клинико-рентгенологических признаков туберкулеза, отрица-
тельная реакция на внутрикожную пробу с препаратом ДИАСКИНТЕСТ® не должна
препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулеза.